Проточная цитометрия (типирование клеток) у кошек и собак

Проточная цитометрия сортирует живые клетки по белкам на их поверхности. У собак и кошек её используют в основном при подозрении на лимфому или лейкоз: она показывает, разросся ли один тип клеток и что это за тип — B-клетки, T-клетки или другие. Она отвечает на часть вопроса; врач читает её вместе с цитологией, общим анализом крови и, если нужно, биопсией.

РазделДругое
МатериалСвежие живые клетки: кровь или костный мозг с ЭДТА, аспират лимфоузла или органа, смытый в физраствор с небольшим количеством сыворотки, или жидкость из полости в пробирке с ЭДТА и без добавок — в холоде (не замораживать), доставка за ночь, как указывает лаборатория
Единицыкачественно
На бланках—

Что показывает

У каждого типа лейкоцитов на поверхности свой набор белков (маркеров). При проточной цитометрии живые клетки окрашивают антителами с флуоресцентной меткой, которые прицепляются к этим маркерам. Затем проточный цитометр считает, сколько клеток каждого типа в пробе; по тому, как клетки рассеивают свет, он заодно оценивает их размер и внутреннюю «зернистость».

Заключение отвечает на два вопроса. Первый — к какой линии относятся клетки: например, T- или B-клетки, а среди T-клеток — CD4 или CD8. Второй — однородна ли популяция: однородная разросшаяся популяция соответствует опухоли, смешанная — реактивному процессу, например воспалению. У собак это часто первый выбор при подозрении на лимфому или лейкоз в крови, лимфоузле или жидкости.

Выше референса — признаком чего может быть

  • Однородная разросшаяся популяция — один тип клеток, которого больше ожидаемого, или клетки с необычным сочетанием маркеров соответствуют лимфопролиферативной болезни, например лимфоме или лимфоидному лейкозу.
  • B- или T-клеточный тип — в заключении названа линия клеток; врач использует это, чтобы спланировать следующие шаги. У некоторых типов узнаваемый рисунок — например, T-клетки, потерявшие общий маркер лейкоцитов, при T-зональной лимфоме собак.
  • Маркер незрелых «стволовых» клеток (CD34) — объективный признак острого лейкоза; иногда линию таких клеток всё равно назвать не удаётся.

Это находки, а не окончательный диагноз: по одной проточной цитометрии рак крови или лимфоидной ткани не диагностируют, а некоторые типы лимфомы уточняют только гистологией.

Ниже референса

Смешанная (неоднородная) популяция соответствует реактивному процессу. Но это решает не всё: набор антител для животных ограничен, а плазматические клетки этим методом не определяются. Проба может оказаться и недиагностической — слишком мало живых клеток. Если результат неясен, лаборатория может сделать PARR на той же пробе.

С чем смотреть вместе

  • Цитология или биопсия того же места — как клетки выглядят под микроскопом; проточная цитометрия подтверждает и дополняет это впечатление.
  • PARR — ДНК-тест на клональность. Он отвечает, произошли ли клетки от одного клона, но тип клеток не определяет; тип называет проточная цитометрия.
  • Лейкоциты и лимфоциты — к пробе крови нужен свежий общий анализ крови, потому что вывод опирается на абсолютные числа клеток.
  • Тимидинкиназа 1 — маркер делящихся клеток в крови, отвечает на другой вопрос.

Единицы и пересчёт

Единиц у результата нет. Заключение — это описание: какие маркеры несут клетки, доля каждого типа клеток, размер клеток и письменная интерпретация, например «разросшаяся популяция B-клеток, соответствует лимфоме». В приложении результат хранится как текст — так, как написан на бланке.

Референс

Ожидаемый результат — на бланке вашей лаборатории. У каждой лаборатории свои референсы долей клеток в крови. Здоровая или реактивная проба показывает смешанную популяцию без неожиданного разросшегося типа клеток. Тесту нужны живые клетки во взвеси, поэтому проба должна прийти в лабораторию холодной и свежей — старую, замороженную или зафиксированную на стекле пробу так исследовать нельзя.

Кошки и собаки

Кошки

У кошек проточную цитометрию используют при высоком числе лимфоцитов в крови и для клеток, уже узнанных на цитологии как опухолевые лимфоциты. Антител для кошек меньше, чем для собак, поэтому во многих случаях нужен ещё и PARR, а при подозрении на лимфому кишечника предпочитают PARR по пробе из кишки. В одном большом исследовании кошек многие пробы не годились из-за слишком малого числа клеток.

Собаки

У собак проточная цитометрия — обычный первый тест при подозрении на опухолевые лимфоциты в любой ткани, при высоком числе лимфоцитов и чтобы отличить тимому от лимфомы в грудной клетке. Антител для собак больше, чем для других видов. Кровь не отправляют, если нет высокого числа лимфоцитов или подозрительных клеток в крови.

В приложении

Добавьте бланк анализа — Pet Tracker Space распознает строки, сохранит единицы с бланка и нарисует каждый показатель во времени с полосой референса вашей лаборатории.

Открыть приложение

Источники

  1. Colorado State University Clinical Hematopathology Laboratory — Principles of Testing and Publications
  2. Colorado State University Clinical Hematopathology Laboratory — Choose a test
  3. Colorado State University Clinical Hematopathology Laboratory — Sample Collection and Submission Instructions
  4. Rout ED, Avery PR. Lymphoid Neoplasia: Correlations Between Morphology and Flow Cytometry. Vet Clin Small Anim 2017
  5. eClinPath (Cornell University College of Veterinary Medicine) — Leukemia: classification tools (immunophenotyping)
  6. Merck Veterinary Manual — Lymphoma in Dogs
  7. Prognostic Utility of the Flow Cytometry and Clonality Analysis Results for Feline Lymphomas. Vet Sci 2024;11(8):331

Эта страница объясняет, что означает показатель. Это не диагноз и не замена ветеринару — только он может истолковать результаты вашего питомца.